antibioticsАнтибиотики и ХимиотерапияAntibiot Khimioter = Antibiotics and Chemotherapy0235-2990ООО «Издательство ОКИ»10.37489/0235-2990-2023-68-9-10-42-45antibiotics-1075Research ArticleЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ СТАТЬИExperimental ResearchИзучение нефротоксичности антибактериальных ЛС на клеточной линии RPTECStudy of Antibacterial Drugs’ Nephrotoxicity in the RPTEC Cell Linehttps://orcid.org/0000-0002-6150-5796ЕвтеевВ. А.EvteevV. A.

Евтеев Владимир Александрович — старший аналитик Научного отдела клинической фармакологии

ResearcherID: E-1204-2017. Scopus Author ID: 16230318000

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, *Correspondence to: 8/2 Petrovsky Blvd., Scientific Centre for НЦЭСМП, г. Москва, 127051

Vladimir A. Evteev — Senior analyst of the Scientific Department of Clinical Pharmacology

ResearcherID: E-1204-2017. Scopus Author ID: 16230318000

8/2 Petrovsky Blvd., Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products, Moscow, 127051 

evteev@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9026-0508СеменоваИ. С.SemenovaI. S.

Семенова Ирина Семеновна — к. б. н., главный эксперт лаборатории биомедицинских клеточных продуктов

Москва

Irina S. Semenova — Ph. D. in Biology, Chief Expert of the Laboratory of Biomedical Cell Products

Moscow

https://orcid.org/0000-0003-0936-5551БунятянН. Д.BunyatyanN. D.

Бунятян Наталья Дмитриевна — д. м. н., профессор, ведущий научный сотрудник Научного отдела клинической фармакологии; заведующая кафедрой фармацевтической технологии и фармакологии

ResearcherID: D-30712018. Scopus Author ID: 6506018057

Москва

Natalya D. Bunyatyan — D. Sc. in Medicine, Professor, Leading Researcher of the Scientific Department of Clinical Pharmacology; Head of the Department of Pharmaceutical Technology and Pharmacology

ResearcherID: D-3071-2018. Scopus Author ID: 6506018057

Moscow

 

https://orcid.org/0000-0001-7024-5546ПрокофьевА. Б.ProkofievA. B.

Прокофьев Алексей Борисович — д. м. н., профессор, начальник научного отдела клинической фармакологии; профессор кафедры клинической фармакологии и пропедевтики внутренних болезней

ResearcherID:  D-D-2961-2018. Scopus Author ID: 57189082881

 

Москва

Aleksey B. Prokofiev — D. Sc. in Medicine, Professor, Head of the Scientific Department of Clinical Pharmacology; Professor of the Department of Clinical Pharmacology and Propaedeutics of Internal Diseases

ResearcherID: D-D-2961-2018. Scopus Author ID: 57189082881 

Moscow

https://orcid.org/0000-0002-5112-6928КукесВ. Г.KukesV. G.

Кукес Владимир Григорьевич — д. м. н., профессор, академик РАН, главный научный сотрудник Научного отдела клинической фармакологии

ResearcherID: D-3908-2018. Scopus Author ID: 7005152932

Москва

Vladimir G. Kukes — D. Sc. in Medicine, Professor, Academician of the Russian Academy of Sciences, Chief Researcher of the Scientific Department of Clinical Pharmacology

ResearcherID: D-3908-2018. Scopus Author ID: 7005152932 

Moscow

ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» МЗ РФ Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияScientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products of the Ministry of Health of the Russian FederationRussian FederationФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» МЗ РФ Министерства здравоохранения Российской Федерации; ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И. М. Сеченова» МЗ РФ (Сеченовский университет)РоссияScientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products of the Ministry of Health of the Russian Federation; I. M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University) of the Ministry of Health of the Russian FederationRussian Federation202315012024689-104245Copyright © Евтеев В.А., Семенова И.С., Бунятян Н.Д., Прокофьев А.Б., Кукес В.Г., 20242024Евтеев В.А., Семенова И.С., Бунятян Н.Д., Прокофьев А.Б., Кукес В.Г.Evteev V.A., Semenova I.S., Bunyatyan N.D., Prokofiev A.B., Kukes V.G.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.antibiotics-chemotherapy.ru/jour/article/view/1075

Созданная клеточная линия человека RPTEC/TERT1 показала максимальное соответствие с первичными человеческими проксимальными почечными канальцами, что делает оптимальным её использование для исследований нефротоксических свойств ксенобиотиков. Измерение трансэпителиального сопротивления (TEER) является ценным неинвазивным методом, который может быть применён для количественной оценки целостности барьера клеток на различных стадиях их роста и дифференцировки, для прогнозирования токсичности и проницаемости лекарственных средств.

Цель исследования — изучить динамику изменения трансэпителиального сопротивления на модели клеточной линии RPTEC/TERT1 при инкубации с ЛС, обладающими нефротоксическим действием.

Материал и методы

Материал и методы. Клеточная линия проксимальных почечных канальцев человека RPTEC/TERT была получена из банка культур клеток ATCC. В эксперименте использовались клетки 14-го пассажа. Изучались следующие препараты: цисплатин — 2,5 мкг/мл; ванкомицин — 50 мкг/мл; дорипенем — 20 мкг/мл; цефепим — 150 мкг/мл. Для каждой концентрации препарата в эксперименте выполнялось 4–5 повторов. Измерения ТЕЕR проводились 4–5 раз для каждой лунки.

Результаты

Результаты. Цисплатин, ванкомицин, дорипенем, цефепим в применяемых концентрациях не оказывают цитотоксического действия на клеточную линию RPTEC по данным динамики TEER.

The created cell line of human proximal renal tubules RPTEC/TERT1 showed maximum compliance with primary human RPTEC, which makes it optimal for use in studies of the nephrotoxic properties of xenobiotics. Transepithelial resistance measurement (TEER) is a valuable non-invasive method that can be used to quantify the integrity of the cell barrier at various stages of cell growth and differentiation, as well as to predict the toxicity and permeability of drugs.

The aim of the study was to examine the dynamics of changes in transepithelial resistance in the model of the RPTEC/TERT1 cell line during incubation with drugs with nephrotoxic effects.

Material and methods

Material and methods. The human proximal renal tubule cell line RPTEC/TERT was obtained from the ATCC cell culture bank. Cells at passage 14 were used in the experiment. The following drugs were studied: cisplatin: 2.5 mcg/ml; vancomycin: 50 mcg/ml; doripenem — 20mcg/ml; cefepim — 150mcg/ml. 4–5 repetitions were performed for each concentration of the drug in the experiment. THEER measurements were carried out 4–5 times for each well.

Results

Results. Cisplatin, vancomycin, doripenem, and cefepim in the concentrations used do not show a cytotoxic effect on the RPTEC cell line according to TEER dynamics. 

антибиотикиклеточные линиинефротоксичностьтрансэпителиальное сопротивлениеantibioticscell linesnephrotoxicitytransepithelial resistanceРабота выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России № 056-00052-23-00 на проведение прикладных научных исследований (номер государственного учёта НИР 121022400082-4).ReferencesWieser M., Stadler G., Jennings P., Streubel B., Pfaller W., Ambros P., Riedl C., Katinger H., Grillari J., Grillari-Voglauer R. hTERT alone immortalizes epithelial cells of renal proximal tubules without changing their functional characteristics. Am J Physiol Renal Physiol. 2008 Nov; 295 (5): F1365–75. doi: 10.1152/ajprenal.90405.2008. Epub 2008 Aug 20. PMID: 18715936.Wieser M., Stadler G., Jennings P., Streubel B., Pfaller W., Ambros P., Riedl C., Katinger H., Grillari J., Grillari-Voglauer R. hTERT alone immortalizes epithelial cells of renal proximal tubules without changing their functional characteristics. Am J Physiol Renal Physiol. 2008 Nov; 295 (5): F1365–75. doi: 10.1152/ajprenal.90405.2008. Epub 2008 Aug 20. PMID: 18715936.Anderson J.M. Molecular structure of tight junctions and their role in epithelial transport. News Physiol Sci. 2001; 16: 126–130. doi: 10.1152/physiologyonline.2001.16.3.126.Anderson J.M. Molecular structure of tight junctions and their role in epithelial transport. News Physiol Sci. 2001; 16: 126–130. doi: 10.1152/physiologyonline.2001.16.3.126.Srinivasan B., Kolli A.R., Esch M.B. et al. TEER measurement techniques for in vitro barrier model systems. J Lab Autom. 2015 Apr; 20 (2): 107–126. doi: 10.1177/2211068214561025.Srinivasan B., Kolli A.R., Esch M.B. et al. TEER measurement techniques for in vitro barrier model systems. J Lab Autom. 2015 Apr; 20 (2): 107–126. doi: 10.1177/2211068214561025.Tiong H.Y., Huang P., Sijing X., Li Y. et al. Drug-induced nephrotoxicity: clinical impact and preclinical in vitro models. Mol Pharm. 2014; 11 (7): 1933–1948. doi: 10.1021/mp400720w.Tiong H.Y., Huang P., Sijing X., Li Y. et al. Drug-induced nephrotoxicity: clinical impact and preclinical in vitro models. Mol Pharm. 2014; 11 (7): 1933–1948. doi: 10.1021/mp400720w.Mac K., Chavada R., Paull S. et al. Cefepime induced acute interstitial nephritis — a case report. BMC Nephrol. 2015; 16, 15. doi: 10.1186/s12882015-0004-x.Mac K., Chavada R., Paull S. et al. Cefepime induced acute interstitial nephritis — a case report. BMC Nephrol. 2015; 16, 15. doi: 10.1186/s12882015-0004-x.Chavers S., Magee G., Baumer D., Pai H. Use of doripenem and risk of seizure and renal impairment in US hospitalized patients: a retrospective cohort study. Ther Adv Drug Saf. 2016 Apr; 7 (2): 43–57. doi: 10.1177/2042098615622330.Chavers S., Magee G., Baumer D., Pai H. Use of doripenem and risk of seizure and renal impairment in US hospitalized patients: a retrospective cohort study. Ther Adv Drug Saf. 2016 Apr; 7 (2): 43–57. doi: 10.1177/2042098615622330.Secker P.F., Schlichenmaier N., Beilmann M. et al. Functional transepithelial transport measurements to detect nephrotoxicity in vitro using the RPTEC/TERT1 cell line. Arch Toxicol. 2019; 93: 1965–1978. doi: 10.1007/s00204-019-02469-8.Secker P.F., Schlichenmaier N., Beilmann M. et al. Functional transepithelial transport measurements to detect nephrotoxicity in vitro using the RPTEC/TERT1 cell line. Arch Toxicol. 2019; 93: 1965–1978. doi: 10.1007/s00204-019-02469-8.Wilmer M.J., Ng C.P., Lanz H.L., Vulto P., Suter-Dick L., Masereeuw R., Kidney-on-a-chip technology for drug-induced nephrotoxicity screening. Trends Biotechnol. 2016; 34 (2): 156–170. doi: 10.1016/j.tibtech.2015.11.001.Wilmer M.J., Ng C.P., Lanz H.L., Vulto P., Suter-Dick L., Masereeuw R., Kidney-on-a-chip technology for drug-induced nephrotoxicity screening. Trends Biotechnol. 2016; 34 (2): 156–170. doi: 10.1016/j.tibtech.2015.11.001.Aschauer L., Limonciel A., Wilmes A. et al. Application of RPTEC/TERT1 cells for investigation of repeat dose nephrotoxicity: a transcriptomic study. Toxicol In Vitro. 2015; 30 (1) PtA): 106–116. doi: 10.1016/j.tiv.2014.Aschauer L., Limonciel A., Wilmes A. et al. Application of RPTEC/TERT1 cells for investigation of repeat dose nephrotoxicity: a transcriptomic study. Toxicol In Vitro. 2015; 30 (1) PtA): 106–116. doi: 10.1016/j.tiv.2014.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.