antibioticsАнтибиотики и ХимиотерапияAntibiot Khimioter = Antibiotics and Chemotherapy0235-2990ООО «Издательство ОКИ»10.1016/0235-2990-2019-64-11-12-16-24antibiotics-163Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL PAPERSИммунокорригирующая и противовирусная активность полисахарида из морских бактерий в отношении вируса клещевого энцефалитаImmunocorrective and Antiviral Activity of Polysaccharide from Marine Bacteria Against Tick-Borne Encephalitis VirusКрыловаН. В.KrylovaN. V.krylovanatalya@gmail.comСмолинаТ. П.SmolinaT. P.noemail@neicon.ruБерлизоваМ. В.BerlizovaM. V.noemail@neicon.ruЛеоноваГ. Н.LeonovaG. N.noemail@neicon.ruФГБНУ Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г. П. СомоваРоссияSomov Institute of Epidemiology and MicrobiologyRussian Federation2019060520206411-121624Copyright © Крылова Н.В., Смолина Т.П., Берлизова М.В., Леонова Г.Н., 20202020Крылова Н.В., Смолина Т.П., Берлизова М.В., Леонова Г.Н.Krylova N.V., Smolina T.P., Berlizova M.V., Leonova G.N.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.antibiotics-chemotherapy.ru/jour/article/view/163

Цель работы - изучение иммунокорригирующей и противовирусной активности экстрацеллюлярного полисахарида (ЭПС) из морских бактерий Pseudoalteromonas nigrifaciens в отношении вируса клещевого энцефалита (КЭ). Материал и методы. Цитотоксичность ЭПС определяли в культуре клеток почек эмбриона свиньи (СПЭВ) с помощью МТТ-теста. Противовирусную активность ЭПС в отношении вируса КЭ оценивали в культурах клеток СПЭВ и мононуклеарных клеток периферической крови человека с помощью методов ингибирования цитопатогенного действия вируса, непрямой иммунофлуоресценции и ПЦР в реальном времени. Иммунокорригирующую активность ЭПС исследовали в образцах цельной крови (от 10 здоровых доноров), инфицированных вирусом КЭ, методами проточной цитофлуориметрии и иммуноферментного анализа. Результаты. Установлено, что ЭПС нетоксичен, ингибирует репликацию вируса КЭ в клетках СПЭВ и мононуклеарных клетках, значительно снижает количество вирус-инфицированных клеток и уровни вирусной РНК, проявляет выраженные вирулицидные свойства (SI - селективный индекс полисахарида более 40). Внесение ЭПС в образцы цельной крови, инфицированные вирусом КЭ, восстанавливает индуцированное вирусом снижение экспрессии CD69, HLA-DR и CD107a на поверхности моноцитов, NK- и CDS+T-клеток и продукцию провоспалительных цитокинов (IL-1/8, IFN-a, TNF-a, IFN-y, IL-6) иммунокомпетентными клетками. Заключение. Полученные результаты позволяют рассматривать экстрацеллюлярный полисахарид из морских бактерий Pseudoalteromonas nigrifaciens в качестве перспективного противовирусного и иммунокорригирующего средства в терапии КЭ.

The aim of this study was to examine the immunocorrective and antiviral activity of extracellular polysaccharide (EPS) from the marine bacteria Pseudoalteromonas nigrifaciens against tick-borne encephalitis virus (TBEV). Materials and Methods. The cytotoxicity of EPS was determined in pig embryo kidney (PK) cells using the MTT test. Antiviral activity of EPS against virus TBE was evaluated in cell cultures of PK cells and human peripheral blood mononuclear cells using the methods of inhibiting the cytopathogenic effect of the virus, indirect immunofluorescence, and real-time PCR. The immunocorrective activity of EPS was investigated in whole-blood samples (from 10 healthy donors) infected with TBEV, using flow cytometry assay and enzyme immunoassay. Results. It was found that EPS is non-toxic, inhibits the TBEV replication in PK cells and mononuclear cells, significantly reduces the number of virus-infected cells and levels of viral RNA, exhibits pronounced virucidal effects (selectivity index of polysaccharide is more than 40). EPS treatment of TBEV-infected whole blood samples restored the virus-induced decline of CD69, HLA-DR and CD107a expression levels on the surface of monocytes, NK and CD8+T-cells and the pro-inflammatory cytokine production (IL-1/3, IFN-a, TNF- a, IFN-y, IL-6) by immunocompetent cells. Conclusion. The results obtained allow considering extracellular polysaccharide from marine bacteria Pseudoalteromonas nigrifaciens as a promising antiviral and immunocorrective agent against TBE infection.

экстрацеллюлярный полисахаридвирус клещевого энцефалитапротивовируснаяиммунокорригирующая активностьextracellular polysaccharidetick-borne encephalitis virusantiviralimmunocorrective activityReferences

The authors declare that there are no conflicts of interest present.