Применение ЛАЛ-теста, в качестве метода определения бактериальных эндотоксинов (БЭ), позволяет нормировать содержание примесей, вызывающих пирогенную реакцию у пациентов. Повышению надёжности и воспроизводимости этого метода способствуют валидационные процедуры, которые являются неотъемлемой частью методик определения БЭ и основаны на построении «модельного опыта», где сравнивают испытуемые и контрольные образцы. В зависимости от методики испытаний (гель-тромб или фотометрические тесты) на наличие БЭ применяют соответствующие валидационные процедуры с оценкой необходимых параметров. Цель данной работы - доказать с помощью валидационных процедур возможность взаимозаменяемости методов определения БЭ на примере препарата «Цефтриаксон, порошок для приготовления раствора для внутримышечного введения 500 мг». Методики исследования: Гель-тромб и хромогенный кинетический тесты. Результаты проведенных испытаний подтверждают воспроизводимость и специфичность методик ЛАЛ-теста. Чувствительность используемого ЛАЛ-реактива подтверждена. В опытах гель-тромб теста для препарата «Цефтриаксон» валидировано разведение 1:160 основного раствора в концентрации 100 мг/мл. Параметры калибровочной кривой в кинетическом хромогенном опыте соответствовали валидационным требованиям (CV<10% и r>0,98). Определение содержания бактериальных эндотоксинов в лекарственном препарате «Цефтриаксон» фотометрическим методом возможно в том же разведении 1:160, где точность определения БЭ в испытуемом образце CV<20%, степень извлечения добавленного эндотоксина равна 108%. Выводы. Проведённые исследования на примере лекарственного препарата «Цефтриаксон» доказали возможность взаимозаменяемости методик определения БЭ, что подтверждено необходимыми валидационными процедурами.
The use of the LAL test as a method for determining bacterial endotoxins (BE) allows us to normalize the content of impurities causing a pyrogenic reaction in patients. Increasing the reliability and reproducibility of this method is promoted by validation procedures, which are an integral part of the methods for determining BE and are based on the construction of a «model experiment» where the test and control samples are compared. Depending on the test procedure (gel-clot or photometric tests) for determining the presence of BE, appropriate validation procedures are used to assess the necessary parameters. The purpose of the study: to prove the possibility of interchangeability of the methods for determining BE with the help of validation procedures on the example of the drug «Ceftriaxone powder for intramuscular injection 500 mg». Research techniques: Gel-clot and Kinetic Chromogenic tests. The results of the conducted tests confirm the reproducibility and specificity of the LAL test methods. The sensitivity of the LAL reagent used is confirmed. In the experiments of the gel-clot test for Ceftriaxone, a dilution of 1:160 of the base solution in the concentration of 100 mg/ml was validated. The parameters of the calibration curve in the Kinetic Chromogenic test corresponded to the validation requirements (CV<10% and r>0.98). Determination of the bacterial endotoxin content in Ceftriaxone by the photometric method is possible at the same 1:160 dilution, where the accuracy of determination of the BE in the test sample is <20%, the degree of extraction of the added endotoxin is 108%. Conclusions. The conducted studies proved the possibility of interchangeability of the methods for determining the BE on the example of the Ceftriaxon drug, which is confirmed by the necessary validation procedures.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.