antibioticsАнтибиотики и ХимиотерапияAntibiot Khimioter = Antibiotics and Chemotherapy0235-2990ООО «Издательство ОКИ»antibiotics-573Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL PAPERSХранение культур актинобактерий - представителей родов Streptomyces и Nonomuraea методом низкотемпературной консервацииStorage of Actinobacteria of the Genera Streptomyces and Nonomuraea by Low Temperature PreservationСиневаО. Н.SinevaO. N.olga.sineva81@yandex.ruКуликоваН. Г.KulikovaN. G.noemail@neicon.ruФилипповаС. Н.FilippovaS. N.noemail@neicon.ruТереховаЛ. П.TerekhovaL. P.noemail@neicon.ruНИИ по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе РАМНРоссияG. F. Gause Institute of New Antibiotics, Russian Academy of Medical SciencesRussian FederationИнститут микробиологии им. С. Н. Виноградского РАНРоссияS. N. Vinogradsky Institute of Microbiology, Russian Academy of SciencesRussian Federation2014130520205911-121115Copyright © Синева О.Н., Куликова Н.Г., Филиппова С.Н., Терехова Л.П., 20202020Синева О.Н., Куликова Н.Г., Филиппова С.Н., Терехова Л.П.Sineva O.N., Kulikova N.G., Filippova S.N., Terekhova L.P.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.antibiotics-chemotherapy.ru/jour/article/view/573

Исследовано влияние низкотемпературного хранения (-70°С) в течение 1,5 лет на жизнеспособность и антибиотическую активность актинобактерий Streptomyces hygroscopicus RIA 1433T, Nonomuraea roseoviolacea subsp. carminata INA 4281 и Nonomuraea sp. INA 34-06. Споры исследованных актинобактерий в концентрациях 105-107 КОЕ/мл сохраняли высокую жизнеспособность при замораживании, однако изучаемые штаммы отличались по сохранению активности в отношении тест-организма Micrococcus luteus ATCC 9341: колонии S.hygroscopicus RIA 1433T полностью сохранили антибиотическую активность в отношении тест-организма Micrococcus luteus ATCC 9341, у штамма Nonomuraea roseoviolacea subsp. carminata наблюдалось снижение антибиотической активности на 5%, потеря антибиотической активности штаммом Nonomuraea sp. INA 34-06 составила 44%. При использовании суспензий с низкой концентрацией спор (102 КОЕ/мл) выявлены различия в устойчивости исследованных штаммов к действию низких температур: штамм S.hygroscopicus RIA 1433T полностью сохранил жизнеспособность и антибиотическую активность при хранении в течение 1,5 лет, в то время как штаммы N.roseoviolacea subsp. carminata INA 4281 и N. sp. INA 34-06 утратили жизнеспособность к 8-му месяцу хранения. Использованный в качестве криопротектора 10% раствор глицерина не влияет на жизнеспособность и антибиотическую активность данных актинобактерий.

The influence of storage of actinobacteria Streptomyces hygroscopicus RIA 1433T, Nonomuraea roseoviolacea subsp. carminata INA 4281 and Nonomuraea sp. INA 34-06 at extremely low temperatures (-70°С) for 1.5 years was studied with respect to their viability and antibiotic activity. The spores of the actinobacteria preserved their high viability when freezed at a concentration of 105-107 CFU/ml. As for the antibiotic activity against the test culture Micrococcus luteus ATCC 9341, the strains differed: the S.hygroscopicus RIA 1433T colonies preserved their antibiotic activity against the test culture, the antibiotic activity of Nonomuraea roseoviolacea subsp. carminata lowered by 5% and that of N. sp. INA 34-06 lowered by 44%. Differences in the resistance of the strains to the storage at the extremely low temperatures were observed when the suspensions contained low concentrations of the spores (102 CFU/ml): S.hygroscopicus RIA 1433T preserved its viability and antibiotic activity during 1.5 years, while N.roseoviolacea subsp. carminata INA 4281 and N. sp. INA 34-06 lost the viability by the 8th month of the storage. The study showed that 10% glycerol solution used as a cryoprotector during the storage had no effect on viability and antibiotic activity of the actinobacteria.

актинобактериихранение культурнизкотемпературная консервацияactinobacteriastoragelow temperature preservationReferencesГорин Е.Е., Хлебникова Г.М., Звягинцев Д.Г. Замораживание почвенных образцов в сухом льду как способ хранения для микробиологических исследований. Микробилогия. 1978; 47: 1: 173-174.Горин Е.Е., Хлебникова Г.М., Звягинцев Д.Г. Замораживание почвенных образцов в сухом льду как способ хранения для микробиологических исследований. Микробилогия. 1978; 47: 1: 173-174.Каменских Т.Н., Калашникова Е.А., Ившина И.Б. Особенности криоконсервации алканотрофных актинобактерий рода Rhodococcus. Вестник пермского университета. 2010; Вып. 1: 15-20.Каменских Т.Н., Калашникова Е.А., Ившина И.Б. Особенности криоконсервации алканотрофных актинобактерий рода Rhodococcus. Вестник пермского университета. 2010; Вып. 1: 15-20.Кузнецова В.И., Новотельнов Н.В. О длительном хранении микроорганизмов. Микробиология 1967; XXXVI: 6: 1100-1104.Кузнецова В.И., Новотельнов Н.В. О длительном хранении микроорганизмов. Микробиология 1967; XXXVI: 6: 1100-1104.Похиленко В.Д., Баранов А.М., Детушев К.В. Методы длительного хранения коллекционных культур микроорганизмов и тенденции развития. Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. 2009; 4: 99-120.Похиленко В.Д., Баранов А.М., Детушев К.В. Методы длительного хранения коллекционных культур микроорганизмов и тенденции развития. Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. 2009; 4: 99-120.Филиппова С.Н., Сургучева Н.А., Гальченко В.Ф. Многолетнее хранение коллекционных культур актинобактерий. Микробиология 2012; 81: 5: 682-690.Филиппова С.Н., Сургучева Н.А., Гальченко В.Ф. Многолетнее хранение коллекционных культур актинобактерий. Микробиология 2012; 81: 5: 682-690.Цуцаева А.А., Ананьина А.Е., Балыбердина Л.М., Степанюк Л.В., Павленко Н.В. Опыт долгосрочного хранения промышленных штаммов микроорганизмов. Микробиология 2008; 77: 5: 696-700.Цуцаева А.А., Ананьина А.Е., Балыбердина Л.М., Степанюк Л.В., Павленко Н.В. Опыт долгосрочного хранения промышленных штаммов микроорганизмов. Микробиология 2008; 77: 5: 696-700.Ryan M.J., Smith D. Cryopreservation and freeze-drying of fungi employing centrifugal and shelf freeze-drying. Cryopreservation and freeze-drying protocols. In: Methods in Molecular Biology. V. 368 / Eds. Day J.G. and Stacey G.N. Totowa. NJ.:Humana Press Inc. 2007. P. 127-140.Ryan M.J., Smith D. Cryopreservation and freeze-drying of fungi employing centrifugal and shelf freeze-drying. Cryopreservation and freeze-drying protocols. In: Methods in Molecular Biology. V. 368 / Eds. Day J.G. and Stacey G.N. Totowa. NJ.:Humana Press Inc. 2007. P. 127-140.Чукпарова А.У. Оценка сохранения жизнеспособности штаммов микроорганизмов при низкотемпературной консервации / Материалы Всероссийского симпозиума с международным участием «Биологически активные вещества микроорганизмов - прошлое, настоящее, будущее». К 90-летию заслуженного профессора Московского университета Н.С.Егорова. М.: 2011; 131.Чукпарова А.У. Оценка сохранения жизнеспособности штаммов микроорганизмов при низкотемпературной консервации / Материалы Всероссийского симпозиума с международным участием «Биологически активные вещества микроорганизмов - прошлое, настоящее, будущее». К 90-летию заслуженного профессора Московского университета Н.С.Егорова. М.: 2011; 131.Витанов Т., Петухов В.Г. Действие низких температур и защитный эффект поливинилпирролидона различного молекулярного веса. Микробиология 1973; XLII; 4: 647-649.Витанов Т., Петухов В.Г. Действие низких температур и защитный эффект поливинилпирролидона различного молекулярного веса. Микробиология 1973; XLII; 4: 647-649.Волков В.Я. К вопросу о физиологических и физико-химических механизмах стабильности микроорганизмов к замораживанию и высушиванию. Микробиология. 1994; 63: Вып. 1: 5-16.Волков В.Я. К вопросу о физиологических и физико-химических механизмах стабильности микроорганизмов к замораживанию и высушиванию. Микробиология. 1994; 63: Вып. 1: 5-16.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.