Изучение нефротоксичности антибактериальных ЛС на клеточной линии RPTEC

Созданная клеточная линия человека RPTEC/TERT1 показала максимальное соответствие с первичными человеческими проксимальными почечными канальцами, что делает оптимальным её использование для исследований нефротоксических свойств ксенобиотиков. Измерение трансэпителиального сопротивления (TEER) является ценным неинвазивным методом, который может быть применён для количественной оценки целостности барьера клеток на различных стадиях их роста и дифференцировки, для прогнозирования токсичности и проницаемости лекарственных средств.

Цель исследования — изучить динамику изменения трансэпителиального сопротивления на модели клеточной линии RPTEC/TERT1 при инкубации с ЛС, обладающими нефротоксическим действием.

Материал и методы. Клеточная линия проксимальных почечных канальцев человека RPTEC/TERT была получена из банка культур клеток ATCC. В эксперименте использовались клетки 14-го пассажа. Изучались следующие препараты: цисплатин — 2,5 мкг/мл; ванкомицин — 50 мкг/мл; дорипенем — 20 мкг/мл; цефепим — 150 мкг/мл. Для каждой концентрации препарата в эксперименте выполнялось 4–5 повторов. Измерения ТЕЕR проводились 4–5 раз для каждой лунки.

Результаты. Цисплатин, ванкомицин, дорипенем, цефепим в применяемых концентрациях не оказывают цитотоксического действия на клеточную линию RPTEC по данным динамики TEER.

1. Wieser M., Stadler G., Jennings P., Streubel B., Pfaller W., Ambros P., Riedl C., Katinger H., Grillari J., Grillari-Voglauer R. hTERT alone immortalizes epithelial cells of renal proximal tubules without changing their functional characteristics. Am J Physiol Renal Physiol. 2008 Nov; 295 (5): F1365–75. doi: 10.1152/ajprenal.90405.2008. Epub 2008 Aug 20. PMID: 18715936.

2. Anderson J.M. Molecular structure of tight junctions and their role in epithelial transport. News Physiol Sci. 2001; 16: 126–130. doi: 10.1152/physiologyonline.2001.16.3.126.

3. Srinivasan B., Kolli A.R., Esch M.B. et al. TEER measurement techniques for in vitro barrier model systems. J Lab Autom. 2015 Apr; 20 (2): 107–126. doi: 10.1177/2211068214561025.

4. Tiong H.Y., Huang P., Sijing X., Li Y. et al. Drug-induced nephrotoxicity: clinical impact and preclinical in vitro models. Mol Pharm. 2014; 11 (7): 1933–1948. doi: 10.1021/mp400720w.

5. Mac K., Chavada R., Paull S. et al. Cefepime induced acute interstitial nephritis — a case report. BMC Nephrol. 2015; 16, 15. doi: 10.1186/s12882015-0004-x.

6. Chavers S., Magee G., Baumer D., Pai H. Use of doripenem and risk of seizure and renal impairment in US hospitalized patients: a retrospective cohort study. Ther Adv Drug Saf. 2016 Apr; 7 (2): 43–57. doi: 10.1177/2042098615622330.

7. Secker P.F., Schlichenmaier N., Beilmann M. et al. Functional transepithelial transport measurements to detect nephrotoxicity in vitro using the RPTEC/TERT1 cell line. Arch Toxicol. 2019; 93: 1965–1978. doi: 10.1007/s00204-019-02469-8.

8. Wilmer M.J., Ng C.P., Lanz H.L., Vulto P., Suter-Dick L., Masereeuw R., Kidney-on-a-chip technology for drug-induced nephrotoxicity screening. Trends Biotechnol. 2016; 34 (2): 156–170. doi: 10.1016/j.tibtech.2015.11.001.

9. Aschauer L., Limonciel A., Wilmes A. et al. Application of RPTEC/TERT1 cells for investigation of repeat dose nephrotoxicity: a transcriptomic study. Toxicol In Vitro. 2015; 30 (1) PtA): 106–116. doi: 10.1016/j.tiv.2014.