Разработка метода высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС/МС) для определения ривастигмина в плазме крови человека в клинических исследованиях сравнительной фармакокинетики

Основой проведения исследований биоэквивалентности является определение биодоступности действующего вещества лекарственного  препарата в месте своего действия для установления концентрации лекарственного вещества в биологических жидкостях с помощью чувствительных аналитических методик. Используемая биоаналитическая методика должна обеспечить  получение  надёжных  результатов, поддающихся удовлетворительной интерпретации. Для проведения исследования  биоэквивалентности препаратов ривастигмина нами был разработан в 8 раз более чувствительный метод (по сравнению с данными  в доступной литературе) количественного  определения  вышеуказанного активного  вещества в плазме  крови человека методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС/МС). Извлечение ривастигмина из плазмы  осуществляется преципитацией белков плазмы  ацетонитрилом. Хроматографическое  разделение ривастигмина и внутреннего стандарта осуществляли  на колонке YMC  Triart С18, 50×2,0 мм, (1,9 µм) в градиентном режиме элюирования со скоростью потока 0,5 мл/мин. В качестве подвижных фаз использовался 0,1% раствор гидроксида аммония  и ацетонитрил.  Нижний предел количественного  определения метода составил 25 пг/мл.

1. Драницына М.А., Захарова Т.В., Ниязов Р.Р. Свойства процедуры двух односторонних тестов для признания биоэквивалентности лекарственных препаратов. Ремедиум. Журнал о российском рынке лекарств и медицинской техники. 2019; 3: 40–47.

2. Ниязов Р.Р., Рождественский Д.А., Васильев А.Н., Гавришина Е.В., Драницына М.А., Куличев Д.А. Регуляторные аспекты регистрации воспроизведённых и гибридных лекарственных препаратов в Евразийском экономическом союзе. Ремедиум. Журнал о российском рынке лекарств и медицинской техники. 2018; 7–8: 6–19.

3. Постановление Правительства Российской Федерации от 29.12.2021 № 2544 «О внесении изменений в государственную программу Российской Федерации «Развитие фармацевтической и медицинской промышленности».

4. Распоряжение Правительства РФ от 12.10.2019 N 2406-р «Об утверждении перечня жизненно необходимых и важнейших лекарственных препаратов на 2020 год».

5. Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 17 февраля 2022 года N 81н «Об утверждении стандарта медицинской помощи пациентам пожилого и старческого возраста при когнитивных расстройствах (диагностика и лечение)».

6. Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 20 декабря 2012 г. № 1228н «Об утверждении стандарта специализированной медицинской помощи при болезни Альцгеймера».

7. Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 28 декабря 2012 г. № 1621н «Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи при органических, включая симптоматические, психических расстройствах, деменции при других болезнях, классифицированных в других рубриках».

8. Инструкция по медицинскому применению лекарственного препарата Экселон, капсулы, Новартис Фарма АГ, Швейцария. Государственный реестр лекарственных средств Российской Федерации. URL: https://grls.rosminzdrav.ru/Grls_View_v2.aspx?routingGuid=55f3d412-750a-4b52-ad33-fc2561306088 (дата обращения 13 ноября 2022 г.).

9. Решение Совета Евразийской экономической комиссии от 3 ноября 2016 г. N 85 «Об утверждении Правил проведения исследований биоэквивалентности лекарственных препаратов в рамках Евразийского экономического союза».

10. Bhatt J., Subbaiah G., Kambli S. et al. A rapid and sensitive liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method for the estimation of rivastigmine in human plasma. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci., 2007; 852 (1–2): 115–121. doi: 10.1016/j.jchromb.2007.01.003.

11. Amini H., Ahmadiani A. High-performance liquid chromatographic determination of rivastigmine in human plasma for application in pharmacokinetic studies. Iran J Pharm Res. 2010; 9 (2): 115–121.

12. Физико-химические свойства ривастигмина: https://www.rlsnet.ru/active-substance/rivastigmin-2281 (дата обращения 21.11.22).

13. Структурная формула ривастигмина: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/77991 (дата обращения 22.11.22).

14. Структурная формула атазанавира-d5: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/25241200#section=Other-Identifiers (дата обращения 22.11.22).

15. Pommier F., Frigola R. Quantitative determination of rivastigmine and its major metabolite in human plasma by liquid chromatography with atmospheric pressure chemical ionization tandem mass spectrometry. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2003; 784 (2): 301–313. doi: 10.1016/s1570-0232(02)00816-4.

16. Frankfort S. V., Ouwehand M., van Maanen M. J., Rosing H., Tulner L. R., Beijnen J. H. A simple and sensitive assay for the quantitative analysis of rivastigmine and its metabolite NAP 226-90 in human EDTA plasma using coupled liquid chromatography and tandem mass spectrometry. Rapid Commun Mass Spectrom. 2006; 20 (22): 3330–3336. doi: 10.1002/rcm.2737.

17. Arumugam K., Chamallamudi M. R., Gilibili R. R. et al. Development and validation of a HPLC method for quantification of rivastigmine in rat urine and identification of a novel metabolite in urine by LC-MS/MS. Biomed Chromatogr. 2011 25 (3): 353-361. doi: 10.1002/bmc.1455.

18. Sato Y., Michihara A., Nagatsuka Y., Yamamoto K., Shirakawa M., Katayama H. High performance liquid chromatography coupled with mass spectrometry for simultaneous determination of rivastigmine and its metabolite in rat plasma. Acta Chromatographica. 2022; 34 (4): 437–443. doi: 10.1556/1326.2021.00989