Чувствительность к антибактериальным препаратам биоплёнок, образованных штаммами холерных вибрионов различных серогрупп

Способность Vibrio cholerae образовывать биоплёнки может вызвать неэффективность лечения и профилактики холеры. Цель исследования — определение антибиотикочувствительности V.cholerae в составе биоплёнок. Материал и методы. Определяли чувствительность к 11 антибактериальным препаратам биоплёнок 10 штаммов V.cholerae различных серогрупп, выделенных от человека и из воды, полученных в течение 48 ч при 37°С на пластиковых пластинках во флаконах с водопроводной автоклавированной водой, заражённых взвесью 10⁴ микробных клеток V.cholerae. Для чего пластинки трёхкратно промывали в физиологическом растворе и переносили в пенициллиновые флаконы с двукратными разведениями антибактериальных препаратов в жидкой питательной среде (бульон Мартена, рН 7,7). Через 24 ч выращивания в термостате (37°С) делали отпечатки биоплёнок и высев 0,1 мл планктонной культуры на пластинки с агаром Мартена (рН 7,7). Результат учитывали через 24 ч, определяя минимальные подавляющие концентрации препаратов по наличию или отсутствию роста V.cholerae. Результаты. Изученные штаммы в составе биоплёночных сообществ, в отличие от планктонной формы, высокорезистентны ко всем антибактериальным препаратам, взятым в исследование, за исключением ципрофлоксацина и цефтазидима. Для повышения эффективности лечения холеры и других инфекций, возбудителями которых являются холерные вибрионы, необходимо определение антибиотикочувствительности биоплёнок V.cholerae.

1. Романова Ю.М., Гинцбург А.Л. Бактериальные биоплёнки как естественная форма существования бактерий в окружающей среде и организме хозяина. Журнал микробиологии. 2011; 3: 99–109.

2. Sadovskaya I., Vinogradov E., Li J. et al. High-level antibiotic resistance in Pseudomonas aeruginosa biofilm: the ndvB gene is involved in the production of highly glycerol-phosphorylated β-(1-3)-glucans, which bind aminoglycosides. Glycobiology. 2010; 20: 895–904. doi: 10.1093/glycob/cwq047. Epub 2010 Mar 26.

3. Farber B.F., Kaplan M.H., Clogston A.G. Staphylococcus epidermidis extracted slime inhibits the antimicrobial action of glycopeptides antibiotics. J Infect Dis. 1990; 161: 37–40. doi: 10.1093/infdis/161.1.37.

4. Mathur T., Singhal S., Khan S et al. Adverse effect of staphylococci slime on in vitro activity of glycopeptides. Jpn J Infect Dis. 2005; 58: 353–357.

5. Татаренко О.А., Алексеева Л.П., Телесманич Н.Р. и др. Влияние некоторых факторов на формирование биоплёнки токсигенными и атоксигенными холерными вибрионами эль-тор. Эпидемиология и инфекционные болезни. 2012; 5: 36–40.

6. Маянский А.Н., Чеботарь И.В., Евтеева Н.И., Руднева Е.И. Межвидовое взаимодействие бактерий и образование смешанной (полимикробной) биоплёнки. Журнал микробиологии. 2012; 1: 93–101.

7. Hay A.J., Zhu J. Host intestinal signal-promoted biofilm dispersal induces Vibrio cholerae colonization. Infect Immun. 2015; 83 (1): 317–323. doi: 10.1128/IAI.02617-14. Epub 2014 Nov 3.

8. Титова С.В., Кушнарева Е.В. Оценка способности холерных вибрионов к образованию биопленок in vitro с помощью нового методического подхода. Фундаментальные исследования. 2014; 10: 375–379.

9. Определение чувствительности возбудителей опасных бактериальных инфекций (чума, сибирская язва, холера, туляремия, бруцеллёз, сап, мелиоидоз) к антибактериальным препаратам. Методические указания МУ 4.2.2495-09. М.: 2009.

10. Санитарно-эпидемиологические правила СП 3.1.1086-02. Профилактика холеры. Общие требования к эпидемиологическому надзору за холерой. М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России. 2002; 85.

11. Фролова Я.Н., Харсеева Г.Г., Миронов А.Ю. Чувствительность к антибиотикам биоплёночных культур токсигенных штаммов Corynebacterium diphtheriae. Клиническая лабораторная диагностика. 2014; 59 (6): 51–53.

12. Чеботарь И.В., Маянский А.Н., Кончакова Е.Д. и др. Антибиотико-резистентность биоплёночных бактерий. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2012; 14 (1): 51–58.

13. Туркутюков В.Б., Ибрагимова Т.Д., Фомин Д.В. Молекулярные особенности морфологии биоплёнок, формируемых штаммами неферментирующих грамнегативных бактерий. Тихоокеанский медицинский журнал. 2013; 4: 44–47.

14. Винник Ю.С., Серова Е.В., Андреев Р.И. и др. Особенности формирования микробных биоплёнок на различных субстратах. Возможность изучения биоплёнок на желчных конкрементах. Современные проблемы науки и образования. 2013; 5: 1–8.

15. Harriott M.M., Noverr M.C. Candida albicans and Staphylococcus aureus form polymicrobial biofilms: effects on antimicrobial resistance. Antimicrob Agents Chemother. 2009; 53 (9): 3914–3922. doi: 10.1128/AAC.00657-09. Epub 2009 Jun 29.

16. Габриэлян Н.И., Горская Е.М., Романова Н.И., Цирульникова О.М. Госпитальная микрофлора и биоплёнки. Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2012; 14 (3): 83–91.

17. May T., Ito A., Okabe S. Induction of multidrug resistance mechanism in Escherichia biofilm by interplay between tetracycline and ampicillin resistance genes. Antimicrob Agents Chemother. 2009; 53 (11): 4628–39.

18. Pagel M., Simonet V., Li J. ey al. Phenotypic characterization of pore mutants of the Vibrio cholerae porin OmpU. J Bacteriol. 2007; 189 (23): 8593–600.

19. Голуб А.В. Бактериальные биоплёнки — новая цель терапии? Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2012; 14 (1): 23–29.

20. Luo Y., Ye J., Jin D. et al. Molecular analysis of non-O1/non-O139 Vibrio cholerae isolated from hospitalized patients in China. BMC Microbiol. 2013; 13: 52. doi: 10.1186/1471-2180-13-52.

21. George N., Fredrick F., Mohapatra A. et al. Non-O1, non-O139 Vibrio cholerae sepsis in a patient with nephrotic syndrome. Indian J Nephrol. 2013; 23 (5): 378–380. doi: 10.4103/0971-4065.116329.